多肽合成儀以固相合成為反應(yīng)原理，在密閉的防爆玻璃反應(yīng)器中使氨基酸按照已知順序不斷添加、反應(yīng)、合成，操作Z終得到多肽載體。固相合成法，大大的減輕了每步產(chǎn)品提純的難度。

　　下面讓我們一起來(lái)了解一下多肽合成儀的原理及步驟吧

　　首先將所要合成肽鏈的羥末端氨基酸的羥基，以共價(jià)鍵的結(jié)構(gòu)和一個(gè)不溶性的高分子樹(shù)脂相連，然后以此結(jié)合固相載體上的氨基酸作為氨基組份，經(jīng)過(guò)脫去氨基保護(hù)基并同過(guò)量的活化羧基組分反應(yīng)，接長(zhǎng)肽鏈。

　　重復(fù)(縮合→洗滌→去保護(hù)→中和及洗滌→下一輪縮合)操作，達(dá)到所要合成的肽鏈長(zhǎng)度，Z后將肽鏈從樹(shù)脂上裂解下來(lái)，經(jīng)過(guò)純化等處理，即得所要的多肽。

　　多肽合成中α-氨基用BOC(叔丁氧羰基)保護(hù)的稱為BOC固相合成法，α-氨基用FMOC(9-芴甲氧羰基)保護(hù)的稱為FMOC固相合成法。

　　多肽合成步驟

　　1、樹(shù)脂的選擇及氨基酸的固定

　　用于多肽合成的高分子的載體主要有3類:交聯(lián)聚苯乙烯;聚酰胺;聚乙烯乙二醇脂類樹(shù)脂。氨基酸的固定主要是通過(guò)保護(hù)的氨基酸的羧基同樹(shù)脂的反應(yīng)基團(tuán)之間形成共價(jià)鍵來(lái)實(shí)現(xiàn)。

　　2、氨基、羧基、側(cè)鏈的保護(hù)及脫除

　　要成功合成具有特定的氨基酸順序的多肽，需要對(duì)暫不參與形成酰胺鍵的氨基和羧基加以保護(hù)，同時(shí)對(duì)氨基酸側(cè)鏈上的活性基團(tuán)也要保護(hù)，反應(yīng)完成后再將保護(hù)基團(tuán)除去。

　　近年來(lái)，F(xiàn)MOC合成法得到了廣泛的應(yīng)用。羧基通常用形成酯基的方法進(jìn)行保護(hù)，甲酯和乙酯是逐步合成中保護(hù)羧基的常用方法。

　　3、成肽反應(yīng)

　　固相中的成肽反應(yīng)一般是將兩個(gè)相應(yīng)的氨基被保護(hù)的氨基酸，及羧基被保護(hù)的氨基酸放在溶液內(nèi)并不形成肽鍵，要形成酰胺鍵，經(jīng)常用的手段是將羧基活化，變成混合酸酐、活潑酯、酰氯或用強(qiáng)的縮合劑(如碳二亞氨)形成對(duì)稱酸酐等方法來(lái)形成酰胺鍵。

　　4、裂解及合成肽鏈的純化

　　BOC法用TFA+HF裂解和脫側(cè)鏈保護(hù)基，F(xiàn)MOC法直接用TFA，有時(shí)根據(jù)條件不同，其它堿、光解、氟離子和氫解等脫保護(hù)方法也被采用。合成肽鏈進(jìn)一步的精制、分離與純化通常采用高效液相色譜、親和層析、毛細(xì)管電泳等。